目的：介绍一种迟发型皮肤超敏反应的新型体外人源细胞系替代评价方法──KeratinoSens试验，并探讨其在两种医疗器械致敏性检测中的应用。方法：构建质粒pGL4.17-AKR1C2-ARE-SV40转染人类永生化角质细胞系HaCaT，用G418筛选得到稳定转染细胞系KeratinoSens(采用此细胞系检测致敏性的方法称为KeratinoSens试验)。采用KeratinoSens试验对已知非致敏物和致敏物进行分析，通过计算阴性对照组的变异度，测试细胞株的稳定性；将试验结果和已知的致敏性进行对比，得出KeratinoSens试验的致敏预测性。采用KeratinoSens试验测试临床上致敏报道较多的医疗器械医用天然乳胶手套和含镍金属的致敏性。结果：阴性对照组的变异度为18.6%，符合稳定性要求，KeratinoSens试验的致敏预测性良好；两种医疗器械的KeratinoSens试验结果均呈阴性。结论：KeratinoSens细胞系构建成功，将其初步应用于医疗器械的致敏性检测，可为该方法转化为医疗器械检测方法提供经验数据。